蛋白純化系統日常維護那些事
近日，“老祖宗的教誨”系列火出了圈，早先傳統文化里輸出的淺顯易懂且實(shí)用的道理，多少年鮮有人留意和傾聽(tīng)。而今，借助AI技術(shù)“復活”老祖宗來(lái)重新復述和講解，聽(tīng)上去確實(shí)有***番道理，有種溫故而知新的感覺(jué)。
儀器維護之道，亦如先賢智慧，貴在知行合***。實(shí)驗室小伙伴們是不是通常會(huì )忽略***些簡(jiǎn)單卻關(guān)鍵的注意事項？縱使使用手冊事無(wú)巨細，若使用者未給予足夠重視，或交接時(shí)疏于詳盡溝通，久而久之，儀器的損耗便如暗流積聚，終有***日徹底“抱恙”——實(shí)驗停滯、項目受阻，更需承擔高昂的維修代價(jià)，屆時(shí)追悔莫及。
這里就以英賽斯公司AutoPure蛋白純化系統為例，簡(jiǎn)要敘述儀器的日常維護和啟停注意事項（其它品牌蛋白純化系統亦可借鑒），愿諸君防患于未然，使儀器歷久彌新。
01 日常維護 每天 整機流路部分 ◇ 清潔擦拭外表，防止溶液結晶鹽腐蝕設備外表面以及元器件； （Ps:***些嚴重的儀器外觀(guān)腐蝕生銹，往往從日常濺液滯留開(kāi)始的。) ◇ 溶液和樣品需過(guò)膜，推薦使用孔徑0.45μm或相當的濾膜過(guò)濾，此操作可有效防止流路堵塞、層析柱填料及檢測器臟污損壞。 ◇ 檢查系統管路和接頭是否存在破損，特別注意Peek管是否有壓折（內徑大的peek管更易彎折，如1mm白管）；防止滲漏，超壓，樣品損失，層析柱損壞。 ◇ 系統使用完畢后，需用純水將系統沖洗干凈至各基線(xiàn)平穩，隨后使用20%乙醇清洗系并保存所有流路，防止流路長(cháng)菌及性能下降。在使用含鹽緩沖液和20%乙醇保存液中間需間隔純水的沖洗，防止混合產(chǎn)生的微氣泡滯留系統。 pH計 ◇ 使用前校正pH計（***定要先校正接近7的點(diǎn)） ◇ 使用后將pH計拆下，使用純水沖洗并擦拭干凈，浸入保護液（pH4.0飽和KCl溶液）保存 ◇ pH 電極前端由***個(gè)薄玻璃膜組成，避免磕碰、污染或干燥，否則會(huì )導致電極損壞。 系統泵 ◇ 每次使用前或更換緩沖液時(shí)，需從排空閥排出泵腔和管路里殘留的氣泡（使用大注射器緩慢抽出至少5ml液體），否則會(huì )影響流速的準確性，甚至導致泵無(wú)法正常出液。 每周 整機流路部分 ◇ 緩沖液入口濾網(wǎng)的檢查和清潔，如果臟污較明顯，可拆下濾網(wǎng)進(jìn)行超聲清洗。 ◇ 檢查泵后潤洗液，確認是否存在顯著(zhù)增加或減少，同時(shí)觀(guān)察是否渾濁，如有異常，需更換潤洗試劑（20%乙醇），并重新做好液位標記。 每月 整機部分 ◇ 使用1M NaOH溶液，AB泵各50%，以系統***大流速的10%沖洗約20分鐘，隨后立即用純水將NaOH沖洗干凈（電導值趨向于0）。 ◇ 使用75%乙醇溶液，AB泵各50%，以系統***大流速的10%沖洗約2分鐘，隨后用純水將乙醇溶液沖洗干凈。 ◇ 在線(xiàn)濾膜拆卸后用0.5M NaOH超聲清洗10分鐘。 背壓閥 ◇ 通過(guò)在線(xiàn)/拆除對比的方式，檢查背壓閥壓力參數（5ml/min流速下0.14MPa±0.05MPa），如有高于設置值情況，可超聲清洗、調節或者更換。如有疑問(wèn)，建議咨詢(xún)當地售后工程師。 每半年 壓力檢測器 ◇ 零點(diǎn)檢查：斷開(kāi)壓力傳感器前端及后端接頭，檢查顯示的壓力數值，如果不在零點(diǎn)且誤差超過(guò)±0.02MPa，聯(lián)系售后工程師進(jìn)行上門(mén)校準。 紫外檢測器 ◇使用注射器將10%的表面活性劑（如Decon90 , SDS等）注入紫外流動(dòng)池，來(lái)回抽吸若干次，停留20分鐘后，用純水沖洗干凈。 ◇使用注射器注入乙醇或1M NaOH注入紫外流動(dòng)池，來(lái)回抽吸若干次，停留20分鐘后，用純水沖洗。 pH/電導檢測器 ◇清洗流通池：拆下pH電極，安裝盲堵，用1M NaOH清洗pH流通池30分鐘，然后用純水沖洗。 ◇清洗pH電極（響應慢，頻發(fā)不準確時(shí))： 1.鹽沉積：0.1M HCl/ 0.1M NaOH/ 0.1M HCl交替洗數次，間隔5分鐘，中間使用水清洗電極； 2.油脂沉積：1%SDS清洗后進(jìn)行水洗； 3.蛋白沉積：1%蛋白酶于0.1M HCl 溶液中清洗后進(jìn)行水洗。 預防性保養 ? 對整個(gè)系統做***次全面細致的維護 ? 降
