色譜柱使用注意事項
色譜柱是***種內有固定相用于分離混合物的柱管,譜柱的分離效果取決于所選擇的固定相,以及色譜柱的制備和操作條件。在使用時(shí)要格外注意這樣才不會(huì )影響柱銷(xiāo)和縮減使用壽命。那么下面就和大***說(shuō)說(shuō)色譜柱的使用注意事項。
要避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動(dòng)。溫度的驟變或者色譜柱從高處掉下都會(huì )影響柱內的填充狀況。
要逐漸改變溶劑的組成,尤其是反相色譜中。
***般說(shuō)來(lái)色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會(huì )迅速降低柱效。
選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。可適當的在進(jìn)樣器前面連接***預柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預柱為硅膠。
避免將基質(zhì)復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進(jìn)行預處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接***保護柱。
注:保護柱***般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。
要經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱,清除殘留在柱內的雜質(zhì)。
保存色譜柱時(shí)應將柱內充滿(mǎn)乙腈或甲醇,將柱接頭擰緊,以防溶劑揮發(fā)干燥。不能將緩沖溶液留在柱內靜置過(guò)夜或更長(cháng)時(shí)間。
色譜柱使用過(guò)程中,如果壓力升高,燒結濾片被堵塞時(shí)應更換濾片或將其取出進(jìn)行清洗;大分子進(jìn)入柱內,使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現塌陷,死體積增大。
在分析柱前裝***根與分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),保護、延長(cháng)柱壽命。
色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達2年以上。以硅膠為基質(zhì)的填料,只能在pH2~9范圍內使用。
每次工作完后,***好用洗脫能力強的洗脫液沖洗,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線(xiàn)平衡。
采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí),使用完后應用無(wú)鹽流動(dòng)相沖洗。
含鹵族元素(氟、氯、溴)的化合物可能會(huì )腐蝕不銹鋼管道,不宜長(cháng)期與之接觸。
裝在HPLC儀上柱子如不經(jīng)常使用,應每隔4~5天開(kāi)機沖洗15分鐘。
以上內容則是色譜柱使用注意事項希望能夠為大***帶來(lái)幫助。