單克隆抗體是由單***B細胞克隆產(chǎn)生的高度均***、僅針對某***特定抗原表位的抗體。它通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備，將具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細胞培養成細胞群，從根本上解決了在抗體制備中長(cháng)期存在的特異性和可重復性問(wèn)題，可直接用于疾病的診斷、預防、治療以及免疫機制的研究。

單克隆抗體制備流程：
（1）免疫動(dòng)物 
免疫動(dòng)物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠產(chǎn)生致敏B淋巴細胞的過(guò)程。***般選用6-8周齡雌性Balb/c小鼠，按照預先制定的免疫方案進(jìn)行免疫注射?？乖ㄟ^(guò)血液循環(huán)或淋巴循環(huán)進(jìn)入外周免疫器官，刺激相應B淋巴細胞克隆，使其活化、增殖，并分化成為致敏B淋巴細胞。 
（2）細胞融合 
采用眼球摘除放血法處死小鼠，無(wú)菌操作取出脾臟，在平皿內擠壓研磨，制備脾細胞懸液。 將準備好的同系骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按***定比例混合，并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，淋巴細胞可與骨髓瘤細胞發(fā)生融合，形成雜交瘤細胞。 
（3）選擇性培養 
選擇性培養的目的是篩選融合的雜交瘤細胞，***般采用HAT選擇性培養基。在HAT培養基中，未融合的骨髓瘤細胞因缺乏次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉移酶，不能利用補救途徑合成DNA而死亡。未融合的淋巴細胞雖具有次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤-磷酸核糖轉移酶，但其本身不能在體外長(cháng)期存活也逐漸死亡。只有融合的雜交瘤細胞由于從脾細胞獲得了次黃嘌呤鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉移酶，并具有骨髓瘤細胞能增殖的特性，因此能在HAT培養基中存活和增殖。 
（4）雜交瘤陽(yáng)性克隆的篩選與克隆化 
在HAT培養基中生長(cháng)的雜交瘤細胞，只有少數是分泌預定單克隆抗體的細胞，因此，必須進(jìn)行篩選和克隆化。通常采用有限稀釋法進(jìn)行雜交瘤細胞的克隆化培養。采用免疫學(xué)方法，篩選出能產(chǎn)生所需單克隆抗體的陽(yáng)性雜交瘤細胞，并進(jìn)行克隆擴增。經(jīng)過(guò)鑒定其所分泌單克隆抗體的免疫球蛋白類(lèi)型、亞類(lèi)、特異性、親和力、識別抗原的表位及其分子量后，及時(shí)進(jìn)行凍存。

（5）單克隆抗體的制備 
單克隆抗體的大量制備主要采用動(dòng)物體內誘生法和體外培養法： 
①體內誘生法  取Balb/c小鼠，***先腹腔注射0.5ml液體石臘或降植烷進(jìn)行預處理。1-2周后，腹腔內接種雜交瘤細胞。雜交瘤細胞在小鼠腹腔內增殖，并產(chǎn)生和分泌單克隆抗體。約1-2周，可見(jiàn)小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可獲得單克隆抗體。 
②體外培養法  將雜交瘤細胞置于培養瓶中進(jìn)行培養。在培養過(guò)程中，雜交瘤細胞產(chǎn)生并分泌單克隆抗體，收集培養上清液，離心去除細胞及其碎片，即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產(chǎn)生的抗體量有限。近年來(lái)，新型培養技術(shù)和裝置不斷出現，提高了抗體的生產(chǎn)量。雜交瘤細胞融合后，要進(jìn)行篩選后才能使用。雜交瘤細胞分為兩次：***次是篩選出雜交瘤細胞；另***次是在初選的雜交瘤細胞中篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜***瘤細胞，這兩次篩選的方法和原理各不相同。

單克隆抗體的制備可應用于以下生命科學(xué)實(shí)驗并具有醫用價(jià)值： 
（1）凝集實(shí)驗：haemaglutination
（2）沉淀反應：Precipitation  reaction
（3）ELISA 等免疫學(xué)檢測 
（4）親和層析：分離蛋白質(zhì) 
（5）免疫印記（western  blotting)
（6）免疫沉淀 
（7）BIAcore  biosensor:檢測Ab-Ag或與蛋白的親和力 
（8）放射免疫學(xué)方法檢測免疫復合物 
（9）磁珠分離細胞 
（10）流式細胞儀：用于細胞的分型和細胞分離 
（11）臨床疾病的診斷和治療