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選擇性高，只對熒光物質(zhì)有響應；靈敏度也高，最低檢出限可達10-12ug/ml，適合于多環(huán)芳烴及各種熒光物質(zhì)的痕量分析。也可用于檢測不發(fā)熒光但經(jīng)化學(xué)反應后可發(fā)熒光的物質(zhì)。如在酚類(lèi)分析中，多數酚類(lèi)不發(fā)熒光，為此先經(jīng)處理使其變?yōu)闊晒馕镔|(zhì)，而后進(jìn)行分析。

檢測原理

化合物受紫外光激發(fā)后，發(fā)射出比激發(fā)光波長(cháng)更長(cháng)的光，稱(chēng)為熒光；

熒光強度 (F) 與激發(fā)光強度 (I0) 及熒光物質(zhì)濃度 (C) 之間的關(guān)系為：F=2.3QKI0εCl

F=KC

Q為量子產(chǎn)率，K為熒光效率，ε為摩爾吸光系數，l為光徑長(cháng)度。

熒光涉及光的吸收和發(fā)射兩個(gè)過(guò)程，因此任何熒光化合物，都有兩種特征的光譜：激發(fā)光譜(excitation spectrum)和發(fā)射光譜(emission spectrum)。

激發(fā)光譜

熒光屬于光致發(fā)光，需選擇合適的激發(fā)光波長(cháng)(Ex)以利于檢測。激發(fā)波長(cháng)可通過(guò)熒光化合物的激發(fā)光譜來(lái)確定。激發(fā)光譜的具體檢測辦法是通過(guò)掃描激發(fā)單色器，使不同波長(cháng)的入射光激發(fā)熒光化合物，產(chǎn)生的熒光通過(guò)固定波長(cháng)的發(fā)射單色器，由光檢測元件檢測。***終得到熒光強度對激發(fā)波長(cháng)的關(guān)系曲線(xiàn)就是激發(fā)光譜。在激發(fā)光譜曲線(xiàn)的***大波長(cháng)處，處于激發(fā)態(tài)的分子數目***多，即所吸收的光能量也***多，能產(chǎn)生***強的熒光。當考慮靈敏度時(shí)，測定應選擇***大激發(fā)波長(cháng) [1]  。

發(fā)射光譜

***般所說(shuō)的熒光光譜，實(shí)際上僅指熒光發(fā)射光譜。它是在激發(fā)單色器波長(cháng)固定時(shí)，發(fā)射單色器進(jìn)行波長(cháng)掃描所得的熒光強度隨熒光波長(cháng)(即發(fā)射波長(cháng)，Em)變化的曲線(xiàn)。熒光光譜可供鑒別熒光物質(zhì)，并作為熒光測定時(shí)選擇合適的測定波長(cháng)的依據。

另外，由于熒光測量?jì)x器的特性，使光源的能量分布、單色器的透射率和檢測器的響應等性能會(huì )隨波長(cháng)而變，所以同***化合物在不同的儀器上會(huì )得到不同的光譜圖，且彼此間無(wú)類(lèi)比性，這種光譜稱(chēng)為表觀(guān)光譜。要使同***化合物在不同的儀器上能得到具有相同特性的熒光光譜，則需要對儀器的上述特性進(jìn)行校正。經(jīng)過(guò)校正的光譜稱(chēng)為真正的熒光光譜。

激發(fā)波長(cháng)和發(fā)射波長(cháng)是熒光檢測的必要參數。選擇合適的激發(fā)波長(cháng)和發(fā)射波長(cháng)，對檢測的靈敏度和選擇性都很重要，尤其是可以較大程度地提高檢測靈敏度