中空纖維細胞培養系統
Spectrum的CELLMAX?人工纖維細胞培養系統與搖瓶、滾瓶等傳統的培養技術(shù)如相比,能更好的模仿細胞在體內的生長(cháng)及產(chǎn)物代謝。在CELLMAX?反應器中,細胞圍繞人工中空纖維網(wǎng)三維方向生長(cháng),纖維管輸送營(yíng)養及溶氧帶走代謝副產(chǎn)物和CO2。人工纖維細胞培養能得到更高的細胞密度及蛋白產(chǎn)量,同時(shí)保持較高的細胞活性。更小的纖維空間能將分泌產(chǎn)物濃縮,收集容易。系統結構簡(jiǎn)單、分泌產(chǎn)物純凈!
人工纖維反應器的優(yōu)點(diǎn) 代謝產(chǎn)物及抑制因子經(jīng)透析遠離細胞 自分泌及條件因子在細胞周?chē)鄯e減少了血清的消耗 培養基的pH是穩定的、適應生理需要 巨大的表面積供細胞貼附、溶氧和營(yíng)養的添加 分泌產(chǎn)物(蛋白&抗體)在小空間(10ml-60ml)ECS中得到濃縮 很容易得到大量的細胞(多達5×1010) 內毒素濃度降低 細胞能夠培養長(cháng)達6個(gè)月 系統是封閉的能夠安全的進(jìn)行病原培養
| 傳統細胞培養設備的缺點(diǎn) 細胞在無(wú)孔的塑料平面二維生長(cháng) 生長(cháng)環(huán)境含有其自身的代謝廢物 自分泌及條件因子在添加培養基時(shí)丟失 培養基的pH會(huì )變得很低,不能適應生理要求 營(yíng)養補充不穩定
細胞的benefit 長(cháng)期培養、穩定的微環(huán)境及自分泌因子使細胞處在類(lèi)似組織及器官的內環(huán)境中 細胞相互接觸并能保持活力 高細胞濃度(108/ml)發(fā)展的相互作用在細胞混合培養時(shí)得到體現 穩定的微環(huán)境,細胞在類(lèi)似體內環(huán)境生長(cháng)
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MWCO:含義及細胞培養的重要性。
膜的截留分子量(MWCO)是用截留百分比間接表示化合物大小的***種方法。MWCO的標準測量單位是道爾頓(Dalton),即***個(gè)氫原子的大小。既然MWCO是測量大小的方法,不能將其直接轉化為公稱(chēng)直徑。關(guān)于長(cháng)度尺寸與MWCO對照的圖表、過(guò)濾的基本知識請電話(huà)告知我們接收您的申請。
營(yíng)養及廢產(chǎn)物的擴散不會(huì )對影響膜的通透性,只有決定在ECS(纖維外空間)中收集產(chǎn)物還是讓其進(jìn)入培養基中時(shí)才需要考慮孔的大小。
為如何選擇***適合您使用的反應器,下面是幾條指導意見(jiàn):
用于收集分泌產(chǎn)物的貼壁細胞
用再生纖維素或聚砜膜。在ECS(纖維外空間)中接種細胞。較大的比表面積使得在較小空間內能培養大量的細胞??讖捷^小,可以在ECS(纖維外空間)中收集濃縮的分泌產(chǎn)物。
用于剪切力研究的貼壁細胞
用聚丙烯涂層或聚乙烯材質(zhì)的反應器進(jìn)行剪切力實(shí)驗。內徑較大,可以將細胞接種在纖維內表面上,測定培養基流速對貼壁細胞的影響。
用于非分泌產(chǎn)物收集的貼壁細胞
任何***個(gè)反應器皆可。如果培養細胞數量較多,選擇***個(gè)表面積較大的反應器。
懸浮細胞
所有的懸浮細胞系都要接種在ECS中。用再生纖維素或聚砜膜。如果不收集產(chǎn)物,可用聚丙烯及聚乙烯膜。
CellMax Duo人工毛細管細胞培養系統
三維細胞培養

CELLMAX? DUO系統的特點(diǎn)是具有兩個(gè)泵站且可以培養基瓶,能夠分別容納兩只CellMax? 中空纖維反應器和培養基瓶同時(shí)進(jìn)行兩個(gè)獨立的細胞培養。該系統結構緊湊可放入標準的潮濕溫控CO2培養箱,所有的表面可以用酒精稀釋液擦拭轉移到組織培養柜中。
泵通過(guò)推壓每只中空纖維反應器上的管路驅動(dòng)培養基流出培養基瓶循環(huán)通過(guò)反應器,這種方式降低因管壁顆粒的脫落進(jìn)而阻礙細胞生長(cháng)的風(fēng)險。硅膠管具有氣體通透性,可以允許CO2自由擴散,維持培養液pH恒定。CellMax? Duo系統可以調節的流量范圍為5-120mL/min。特殊的推動(dòng)閂設計允許使用者利用單個(gè)泵進(jìn)行低流量培養,而另外***個(gè)泵可以維持高流量。也可以選用灌注套裝實(shí)現纖維外空間(ECS)的流量循環(huán),降低微環(huán)境條件可能對細胞培養產(chǎn)生的傷害。
泵基座通過(guò)***條電源線(xiàn)與外部電子控制單元(ECU)連接,ECU背面有磁性可以貼附在培養箱的外殼上。ECU有11個(gè)檔位進(jìn)行流量調節。
CellMax Quad系統
同時(shí)操控四個(gè)培養過(guò)程

CELLMAX? Quad人工纖維細胞培養系統是專(zhuān)門(mén)為哺乳動(dòng)物細胞的培養而設計的。
CELLMAX? Quad的特點(diǎn)是位移泵裝置提供壓力保證人工纖維反應器的長(cháng)期培養,精確控制12種流速。調節范圍廣的流速對特定剪切力條件下的內皮細胞研究非常有用。
該系統可同時(shí)操控多達四個(gè)分離、獨立的反應器。該系統***大的滿(mǎn)足你的需求,對于無(wú)論是同時(shí)進(jìn)行幾種細胞系的培養,還是在單個(gè)系統里進(jìn)行單個(gè)類(lèi)型細胞的重復研究,它都是***個(gè)理想的選擇。
CellMax? 細胞培養系統的應用:
單克隆抗體生產(chǎn)
當需要在體外生產(chǎn)50毫克至幾克的單克隆抗體時(shí), CELLMAX?人工纖維細胞培養系統是個(gè)不錯的選擇。用到的纖維質(zhì)纖維的截留分子量(MWCO)為30kd。抑制因子TGFbeta(轉化生長(cháng)因子β)能自由擴散,較纖維外空間(ECS)中。細胞密度能多于108/ml,抗大分子量的免疫球蛋白類(lèi)則與雜交瘤細胞***起留在體的濃度范圍為0.5mg-5mg/ml。收集液的體積僅為10-20ml,每個(gè)反應器能夠持續生產(chǎn)抗體長(cháng)達4-6個(gè)月。血清可逐漸減少,逐步適應無(wú)血清的培養基。嵌合型非小鼠抗體的生產(chǎn)很容易,減少或消除了生理污染物如類(lèi)酯、內毒素、蛋白及病毒的影響。凈化簡(jiǎn)便,總產(chǎn)量得到改善。
內皮細胞培養
Spectrum已開(kāi)發(fā)了幾種人工纖維細胞培養反應器,可用于內皮細胞的培養及對其在流動(dòng)條件下的研究。與其他方法相比,該系統更接近生理環(huán)境,可以進(jìn)行細胞功能的評估。細胞形態(tài)呈現出與體內條件接近的結果。
CELLMAX? Quad提供了與靜脈或動(dòng)脈血相接近的剪切力水平。另外,纖維管的微孔特性為平滑肌、腦神經(jīng)膠質(zhì)細胞等血管外周細胞的共培養創(chuàng )造了***個(gè)理想的模型。

上圖是剪切力為13-15dynes/cm2的似動(dòng)脈條件下,在CELLMAX?中培養的內皮細胞的掃描電子顯微照片。纖維管縱向剖開(kāi)后,可以看到中空纖維外壁表面附著(zhù)***層細胞。經(jīng)人工處理后,單層細胞的***邊已經(jīng)部分脫離了纖維內表面,表明了內皮細胞層具有的粘附特性。
分泌蛋白生產(chǎn)
目前的生物分泌物如生長(cháng)因子、重組蛋白及抗體的生產(chǎn)及收集,使用的是效率低下的體外培養系統或動(dòng)物。CELLMAX?人工纖維細胞培養系統能夠在體積?。?0ml-100ml)的纖維外部空間進(jìn)行高密度(高達5×1010個(gè)細胞)的細胞培養。纖維管獨特的分子截留能力能夠將分泌產(chǎn)物截留在小空間中,小分子營(yíng)養及代謝廢物則可以自由擴散到循環(huán)培養基中。使用CELLMAX?系統,無(wú)論是產(chǎn)物的總濃度還是單個(gè)細胞的分泌量都能增加到原來(lái)的10倍或更多??s小的生產(chǎn)空間及低血清或無(wú)血清培養基的使用簡(jiǎn)化了生產(chǎn)后的凈化。