目前,大部分的細胞檢測方法采用的仍然是傳統的終點(diǎn)法——僅僅給出最終結果,而且往往需要標記細胞和破壞細胞。這種方法無(wú)法得到細胞在生長(cháng)時(shí)的真正狀態(tài),也無(wú)法對細胞的生長(cháng)過(guò)程做出動(dòng)態(tài)的監測和分析。美國Essen公司開(kāi)發(fā)了第二代長(cháng)時(shí)間實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)活細胞成像分析儀——IncuCyte Zoom,用一種非侵入式的方法,記錄細胞的實(shí)時(shí)生長(cháng)狀態(tài)。這種成像方法,被稱(chēng)為“實(shí)時(shí)細胞內涵成像”(Live Content Imaging),擴充了用戶(hù)記錄和理解細胞生長(cháng)、細胞行為和細胞形態(tài)的途徑。
IncuCyte Zoom是一套用于非傷害的、長(cháng)時(shí)間實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的活細胞成像分析平臺。IncuCyte分為信號采集機和控制機兩部分,信號采集機可放置于培養箱中,中間放置多種規格尺寸的板、皿、瓶及載玻片,在其下方有顯微照相設備,通過(guò)顯微拍照,對培養細胞進(jìn)行連續的監測,并通過(guò)聯(lián)網(wǎng)的電腦進(jìn)行遠程控制、數據讀取與分析。系統可自動(dòng)收集每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的相差圖像和紅/綠熒光圖像。用戶(hù)除了可以得到各種格式的圖像或動(dòng)態(tài)錄像外,還可以得到由系統軟件自動(dòng)依據飽和度和計數分析生成的基于圖像應用的圖表,以顯示細胞的變化及趨勢。
IncuCyte的優(yōu)勢:1)培養的細胞用高清晰度相差顯微鏡或熒光顯微鏡直接監測,為非破壞性的監測,細胞不用染色便可以觀(guān)察監測,影像效果好;2)監測過(guò)程中細胞無(wú)需離開(kāi)培養箱,不用擔心培養條件的改變對細胞的影響;3)真正的長(cháng)時(shí)間的動(dòng)態(tài)活細胞成像,可達數天或數月,高清晰度相差成像能消除微孔板的彎液面缺陷(meniscus artifacts),且沒(méi)有傳統顯微系統的光暈問(wèn)題,可以在384微孔板內監測細胞形態(tài);4)圖像處理軟件自動(dòng)依據飽和度和計數分析,量化細胞增殖;5)自動(dòng)輸出細胞生長(cháng)曲線(xiàn)和細胞生長(cháng)錄像;6)實(shí)時(shí)監控,可改變傳統的“終點(diǎn)法”實(shí)驗方法,數據豐富,更準確、更靈活;7)高通量,可同時(shí)監測6塊標準規格的細胞培養板/皿/瓶/載玻片,包括96-孔微孔板和384-孔微孔板,細胞在384-孔微孔板內實(shí)驗,可以減少寶貴的藥品消耗;8)支持超過(guò)200種的標準培養容器,無(wú)需特殊的培養容器,節約后期實(shí)驗成本;9)可遠程監控,進(jìn)行數據讀取和分析,無(wú)需反復出入細胞房,避免了潛在的污染隱患及人工出入觀(guān)測之麻煩。

圖1:培養箱中的IncuCyte Zoom
與第一代成像儀IncuCyte FLR相比,IncuCyte Zoom是全新設計的,增加了很多關(guān)鍵的性能,包括支持多通道熒光成像,支持多物鏡選擇,增加了形態(tài)處理的能力和達到更高的速度。新增的特性有:1)IncuCyte Zoom可支持高清晰度(HD)相差、黃綠熒光和紅色熒光自動(dòng)成像功能,圖像處理軟件支持對三通道成像的整合處理;2)用戶(hù)可在1分鐘之內自行更換4×、10×和20×物鏡,而無(wú)須專(zhuān)業(yè)人員的幫助;3)因為擁有12個(gè)全核處理器和新的軟硬件,其成像速度達到了第一代FLR的兩倍;4)采用了新的相機設計,使其更適合長(cháng)時(shí)間觀(guān)察;5)設計了新的數據庫,使用戶(hù)能更方便的查找和檢索實(shí)驗數據;6)增加了數據的存儲量,配備了9TB的存儲空間,并支持外部數據存儲系統;7)提高了空氣流速,改善了散熱性能,增加了掃描時(shí)間;8)增加了系統監控,整合了濕度傳感器、加速計來(lái)監測不可接受的震動(dòng)、風(fēng)扇速度和內部溫度;9)用戶(hù)可用位于控制機前部的LCD控制面板方便地檢測和運行基礎狀態(tài)檢查和操作。

圖2:IncuCyte內部結構,支持超過(guò)200種標準培養容器,可同時(shí)觀(guān)察多達6塊培養容器

圖3:IncuCyte記錄的細胞的相差圖像和增殖曲線(xiàn)
圖3是IncuCyte記錄的細胞增殖的相差圖像和增殖曲線(xiàn)。左側圖像是在同一視野內間隔12小時(shí)拍攝的CHO細胞的相差圖像,圖像可以24小時(shí)連續生成,而無(wú)需將細胞移出培養箱。右側的增殖曲線(xiàn)是依據間隔3小時(shí)的圖像生成的,由軟件自動(dòng)將圖像數據轉換成定量的飽和度vs.時(shí)間的數據,生成動(dòng)態(tài)的增殖曲線(xiàn)。最后圖像會(huì )被導出成單獨的JPEG文件或視頻。
IncuCyte軟件功能:用戶(hù)可以在任何一臺聯(lián)網(wǎng)的計算機上操控儀器,而無(wú)需反復拿進(jìn)拿出標本及出入細胞房,這使IncuCyte成為了一個(gè)“虛擬的培養箱”。IncuCyte最好的特點(diǎn)之一就是直覺(jué)式的軟件界面設計。用戶(hù)可以在軟件的操作界面上定義耗材的類(lèi)型、拍攝的時(shí)間、位置及視野個(gè)數。支持在長(cháng)時(shí)間拍攝過(guò)程中插入其他拍攝任務(wù)繼續進(jìn)行拍攝,以充分利用儀器。IncuCyte可以自動(dòng)對焦,自動(dòng)進(jìn)行圖像收集。對得到的圖像也可以進(jìn)行亮度、尺寸、對比度的顯示控制。用戶(hù)可以自定義樣本信息,進(jìn)行分組分析,并可以電子化標記器皿,設定關(guān)鍵詞,必要時(shí)可用設定的關(guān)鍵詞搜索數據庫,方便查詢(xún)過(guò)去任何時(shí)間得到的圖像和數據。用戶(hù)還可以直接從軟件中抓取圖像、圖表、曲線(xiàn)至Word、Excel、Powerpoint和Email中。生成的所有數據均可存檔,并且數據和圖表可以打包封存,便于用戶(hù)帶回家分析。IncuCyte Zoom的新特性包括多熒光圖像處理模塊和新的相差成像處理模塊。Zoom還設計了新的數據庫,使用戶(hù)能更容易查找和檢索實(shí)驗數據。

圖4:軟件操作界面
IncuCyte的應用:
(一) 監測細胞增殖(Proliferation)
可監測細胞的飽和度,或用熒光標定細胞核,計算細胞核的個(gè)數。
關(guān)鍵特性:1)IncuCyte Zoom結合NucLight Red和NucLight Green試劑,直接監測細胞增殖;2)在4×、10×或20×物鏡條件下對細胞核進(jìn)行實(shí)時(shí)計數;3)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)可提供576個(gè)(96孔板)和2304個(gè)(384孔板)孔的數據;4)自動(dòng)進(jìn)行圖像獲取和處理;5)可計算基于細胞核計數的倍增時(shí)間,而無(wú)須lift細胞;6)可得到生長(cháng)因子對原生細胞(primary cells)和長(cháng)生細胞(immortalized cells)增殖的影響;7)細胞不離開(kāi)培養箱,所有數據均有圖像和影片驗證。

圖5:轉染NucLight Red lentivirus試劑的HT-1080細胞用不同濃度的放線(xiàn)菌酮(Cycloheximide,CHX)處理,在4×條件下用Zoom每3小時(shí)拍攝一次。雖然沒(méi)有觀(guān)察到細胞形態(tài)的變化,但觀(guān)察到基于濃度的細胞增殖的抑制。曲線(xiàn)下面積(AUC)值被用于計算化合物的IC50值。倍增時(shí)間通過(guò)計算指數生長(cháng)公式得到。下方的圖像為48hr時(shí)的熒光圖像。

圖6:HUVEC細胞用NucLight Red lentivirus試劑轉染,血清饑餓2hr后用含1%FBS和不同濃度bFGF的基礎培養基培養(左圖),或bFGF保持在10ng/ml,而Suramin的濃度不斷增大(右圖)。用Zoom每3hr拍攝一次,左圖用4×物鏡拍攝,而右圖用10×物鏡拍攝。整個(gè)實(shí)驗進(jìn)程中都進(jìn)行了細胞核計數,并通過(guò)計算曲線(xiàn)下面積(AUC)獲得EC50和IC50值。
(二)細胞質(zhì)控(Cell Culture QC)/細胞培養優(yōu)化(Cell Culture Optimization)
監測細胞形態(tài)上的變化,對細胞培養進(jìn)行質(zhì)控,如進(jìn)行自動(dòng)化的細胞培養,用175T培養瓶,培養出大量且高質(zhì)量的細胞,可做進(jìn)一步細胞分析實(shí)驗的細胞來(lái)源。監測生長(cháng)曲線(xiàn)與培養基的血清濃度的變化,尋找最適合的培養基的血清濃度。監測生長(cháng)曲線(xiàn)與培養基的配方的變化,尋找最適合的培養基配方。
關(guān)鍵特性:1)對高清晰相差成像進(jìn)行用戶(hù)定義的相分割;2)可收集到4×、10×或20×的圖像;3)非標記的相分割指標利用細胞飽和度跟蹤細胞隨時(shí)間的生長(cháng)狀況;4)能夠檢測促血管生成(pro-angiogenic)和抗血管生成(anti-angiogenic)的反應;5)可對克隆進(jìn)行計數和大小觀(guān)察;6)可通過(guò)對培養瓶不同部位的成像,優(yōu)化細胞的分布;7)可對圖像和數據進(jìn)行存檔,以便在未來(lái)對生長(cháng)特性進(jìn)行回顧確認;8)根據細胞飽和度,優(yōu)化原生細胞和長(cháng)生細胞的生長(cháng)條件;9)可決定最佳接種密度;10)可分析微孔板布局,促進(jìn)移液技術(shù)。

圖7:HUVEC細胞培養在包含生長(cháng)因子和不同濃度胎牛血清(FBS)的培養基中,HUVEC的最佳FBS濃度是>2.5%。

圖8:對不同接種密度的HT-1080細胞每3小時(shí)拍攝一次,一共拍攝3天,得到實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的飽和度vs.時(shí)間的圖像。
(三) 監測細胞毒性(Cytotoxicity)
細胞毒性發(fā)生時(shí),細胞膜會(huì )破裂,這時(shí)使用非滲透的染料YOYO-1就可以將發(fā)生細胞毒性的細胞染色,然后用IncuCyte進(jìn)行觀(guān)察。
關(guān)鍵特性:1)運用NucLight試劑,并結合細胞非滲透性DNA染料;2)可區別細胞毒性(Cytotoxic)和細胞抑制(Cytostatic);3)可從雙色分析儀中輸出數據,計算EC50和IC50;4)可通過(guò)獲取4×、10×或20×的高清晰度相差圖像,跟蹤細胞形態(tài),確認細胞是否死亡;5)可保存和重新使用過(guò)程定義,為未來(lái)的實(shí)驗分析YOYO-1和NucLight-Red數據。

圖9: HT-1080細胞用NucLight-Red標記,并在YOYO-1存在的條件下用喜樹(shù)堿(Camptothecin)處理。高清晰度相差圖像和熒光圖像用于確認細胞是否死亡。

圖10:用基礎分析儀(Basic Analyzer)計算紅色細胞核的個(gè)數和YOYO-1標記的細胞隨時(shí)間的變化。數據輸出后,曲線(xiàn)下面積(AUC)被用來(lái)計算喜樹(shù)堿(Camptothecin)對HT-1080細胞作用的IC50值和EC50值。

圖11:喜樹(shù)堿(Camptothecin)(上圖)和Cycloheximide(放線(xiàn)菌酮)(下圖)引起的HT-1080細胞的毒性(Cytotoxic Effects)和抑制作用(Cytotostatic Effects)。左圖表示用YOYO-1動(dòng)態(tài)顯示的細胞的死亡,右圖表示用NucLight Red顯示的細胞的增殖。
(四) 監測細胞凋亡(Apoptosis)
CellPlayer細胞凋亡試劑盒中的凋亡試劑是DNA染料和Caspase3/7酶的底物的連接物。如果細胞發(fā)生Caspase3/7途徑的凋亡,當將此試劑加入培養基時(shí),細胞膜上的活化的Caspase 3/7酶就會(huì )降解此連接物,使原來(lái)不發(fā)光的染料從連接物中脫離下來(lái),與細胞的DNA雙鏈結合,從而發(fā)出黃綠熒光,被IncuCyte檢測到。這樣就可以用IncuCyte觀(guān)察細胞的凋亡全過(guò)程。
關(guān)鍵特性:1)用NucLight試劑標記細胞來(lái)檢測細胞的增殖,并動(dòng)態(tài)監控化合物的細胞抑制(抗增殖)作用;2)直接向細胞中加入Caspase 3/7試劑,而無(wú)需額外的洗滌步驟,可檢測由內在或外在途徑引起的細胞凋亡;3)可從雙色分析儀中輸出數據,計算IC50和EC50。4)用4×、10×或20×物鏡觀(guān)察高清晰度相差圖像,以確定細胞的死亡;5)定量的可重復性:可保存并重新使用過(guò)程定義,方便未來(lái)實(shí)驗時(shí)分析Caspase 3/7和NucLight Red數據;可進(jìn)行96孔和384孔形式的實(shí)驗;每次可觀(guān)察6塊微孔板。
內在通路(Intrinsic Pathway)引起的細胞凋亡:

圖12:表現為紅色細胞核的宮頸腺癌細胞在有Caspase 3/7試劑的條件下用不同濃度的十字孢堿(Staurosporine,SSP)處理。過(guò)程定義可以準確計量紅色細胞核對象個(gè)數和綠色Caspase 3/7對象個(gè)數。

圖13:通過(guò)基礎分析儀輸出Caspase對象個(gè)數/mm2和細胞核對象個(gè)數/mm2,并利用曲線(xiàn)下面積(AUC)計算出EC50和IC50。

圖14:用基礎分析儀,可檢測隨時(shí)間改變的Caspase 3/7活性(左圖)和細胞核個(gè)數(右圖)。

圖15:外在通路引起的細胞凋亡。在5μg/ml放線(xiàn)菌酮(Cycloheximide)存在的條件下用不同濃度的腫瘤壞死因子α(TNF-α)處理A549肺上皮細胞(Lung Epithelial Cells),用基礎分析儀定量計算Caspase 3/7的活性。
(五) 監測細胞遷移(Cell Migration)/監測細胞侵襲(Cell Invasion)
IncuCyte的Migration模組中有96孔的傷口劃痕器(Wound Maker),可以在96孔微孔板上生成96個(gè)均勻一致的傷口,然后用IncuCyte記錄傷口愈合(Wound Healing)的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)全過(guò)程。
IncuCyte可以從預設的時(shí)間點(diǎn)來(lái)獲得圖像并轉換成影片。系統記錄了初始的Wound Mask,然后隨著(zhù)Revised Wound Mask的生成,系統持續記錄圖像來(lái)跟蹤傷口的愈合。IncuCyte還可用于其它細胞運動(dòng)如“遷移”和“侵襲”的監測。用戶(hù)可以很直觀(guān)地通過(guò)2D的遷移和3D的侵襲圖像來(lái)觀(guān)察細胞形態(tài)的變化,并對兩種細胞運動(dòng)方式進(jìn)行對比。在我們的高清成像基礎上,細胞無(wú)需標記就可以進(jìn)行觀(guān)察。使用專(zhuān)利的算法,可以得到綜合的基于時(shí)間推移的持續性圖像采集指標,包括:相對傷口密度(專(zhuān)利)、傷口飽和度、傷口寬度,使實(shí)驗結果的定量性和重復性更好。所有時(shí)間點(diǎn)的指標都可以通過(guò)細胞圖像和影片進(jìn)行驗證。
細胞遷移/細胞侵襲的關(guān)鍵特征:1)可在同一塊96孔微孔板中通過(guò)4×、10×或20×的物鏡測量2D的細胞遷移和3D的細胞侵襲;2)在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)可生成576個(gè)孔的數據(6×96);3)可對原生細胞系和長(cháng)生細胞系進(jìn)行非標記的細胞遷移/細胞侵襲定量測定;4)可自動(dòng)分析測量相對傷口密度、傷口飽和度和傷口寬度;5)可用圖像和時(shí)序錄像驗證藥理學(xué)作用;6)可用Zoom的雙色熒光系統拍攝和研究細胞遷移和細胞侵襲中的熒光細胞。

圖16:左圖是HT-1080細胞在8mg/ml Matrigel中的細胞侵襲圖像;右圖是MDA-MB-231細胞在6mg/ml Matrigel中的細胞侵襲圖像。

圖17:左圖是三種細胞系,HT-1080、MDA-MB-231和MCF-7的細胞遷移曲線(xiàn);左圖是兩種細胞系,HT-1080和MDA-MB-231的細胞侵襲曲線(xiàn),MCF-7細胞不發(fā)生細胞侵襲。

圖18:藥理學(xué)研究:顯示肌球蛋白抑制劑(blebbistatin)對HT-1080細胞在8mg/ml Matrigel中的細胞侵襲的濃度響應。
(六)監測血管新生(Angiogenesis)
血管新生是一種復雜、多步的過(guò)程,包括內皮細胞增殖、內皮細胞遷移和血管形成。IncuCyte的CellPlayer Angiogenesis PrimeKit將GFP標記的人臍帶血管內皮細胞(human vascular endothelial cells,HUVECs)和正常的人真皮成纖維細胞(normal human dermal fibroblast,NHDFs)共培養,共培養物就會(huì )有新生血管生成,然后用IncuCyte進(jìn)行觀(guān)察。IncuCyte Zoom和CellPlayer Angiogenesis PrimeKit合用,能監測血管生成的全過(guò)程,同時(shí)測定藥物對血管生成的作用。
關(guān)鍵特性包括:1)使用人類(lèi)的原生細胞和共培養體系顯示血管新生過(guò)程中的所有階段的變化;2)有活細胞和冷凍細胞試劑盒兩種選擇;3)Zoom和血管新生軟件相結合可自動(dòng)獲取時(shí)序性圖像,提供血管長(cháng)度、血管面積和分支節點(diǎn)個(gè)數等動(dòng)態(tài)指標;4)動(dòng)態(tài)讀數可研究復雜的通路,包括VEGF(血管內皮生長(cháng)因子)和non-VEGF(非血管內皮生長(cháng)因子)信號介導的血管新生和血管分解;5)能測量促血管生成(pro-angiogenic)和抗血管生成(anti-angiogenic)的作用;6)所有數據均有圖像和影片進(jìn)行驗證;7)可在96孔微孔板中反應,數據定量并可重復。
Essen可提供CellPlayer血管新生原生冷凍試劑盒(CellPlayer Angiogenesis PrimeKit -Cryo)、CellPlayer血管新生原生新鮮試劑盒(CellPlayer Angiogenesis PrimeKit-Live),和血管新生實(shí)驗外包服務(wù)。具體試劑盒規格和實(shí)驗外包服務(wù)可參考Essen網(wǎng)站。

圖19:血管新生,第1天和第14天對比,血管長(cháng)度從0.6mm/mm2增長(cháng)到11.6mm/mm2

圖20:不同濃度的血管內皮生長(cháng)因子(VEGF)對血管新生的動(dòng)態(tài)作用。
另一種試劑盒是CellPlayer Angiogenesis StemKit,它將用GFP標記的內皮克隆形成細胞(endothelial colony-forming cells,EDFC)和脂肪組織來(lái)源干細胞(adipose-derived stem cells,ADSC)共培養,共培養物就會(huì )有新生血管生成,然后用IncuCyte進(jìn)行觀(guān)察。IncuCyte Zoom和CellPlayer Angiogenesis StemKit合用,能監測血管生成的全過(guò)程,同時(shí)測定藥物對血管生成的作用。
關(guān)鍵特性包括:1)是人類(lèi)來(lái)源的共培養干細胞模型;2)以冷凍試劑盒形式提供;3)比PrimeKit試劑盒的血管生成速度更快;4)外皮細胞生物學(xué)(Pericyte biology);5)可對血管形成和血管分解進(jìn)行動(dòng)態(tài)讀??;6)所有指標均有圖像和錄像進(jìn)行驗證;7)可在96孔微孔板上進(jìn)行實(shí)驗,重復性好(Z’>0.8)。
Essen可提供冷凍形式的CellPlayer血管新生干細胞試劑盒(CellPlayer Angiogenesis StemKit)和血管新生實(shí)驗外包服務(wù)。具體試劑盒規格和實(shí)驗外包服務(wù)可參考Essen網(wǎng)站。

圖21:將促血管新生蛋白因子(angiopoietin 2,Ang-2)加入已形成的血管網(wǎng)絡(luò )中,動(dòng)態(tài)數據顯示血管發(fā)生分解。
(七) 監測報告基因(Reporter Gene)
細胞用含GFP的載體轉染,GFP的上游插入需要研究的啟動(dòng)子。這樣就可以通過(guò)IncuCyte觀(guān)察GFP的熒光強度和發(fā)出熒光的細胞數目,從而監測啟動(dòng)子的活性或報告基因的表達活性。
與傳統的終點(diǎn)熒光素酶方法對比,IncuCyte的關(guān)鍵特征在于:1)數據豐富:96孔的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)數據可獲得終點(diǎn)法無(wú)法獲得的洞察能力;2)節約成本:無(wú)需裂解,無(wú)需熒光素酶法需要的終端反應底物,節省時(shí)間和花費;3)方便:實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)讀數使用戶(hù)能在單個(gè)的實(shí)驗中優(yōu)化信號窗,無(wú)需事先決定何時(shí)終止實(shí)驗;4)敏感:可得到每個(gè)條件下的多個(gè)時(shí)間點(diǎn)數據,增加了實(shí)驗的定量性和穩定性(quantitative robustness);5)可定制:用戶(hù)可根據需要定制啟動(dòng)子,修改反應體系,監測藥物對報告基因的作用。
Essen可按照客戶(hù)需要提供此實(shí)驗的外包服務(wù),具體外包服務(wù)內容請參考Essen網(wǎng)站。

圖22:rhTNF-α刺激誘導的HEK293細胞中,rhGFP報告基因表達的NF-κB的活性。在用pNF-κB-rhGFP報告基因轉染的HEK293細胞中,用3倍稀釋的rhTNF-α處理。圖像以15min為間隔獲得。對象飽和度(Object Confluence)表示報告基因的表達和/或啟動(dòng)子的活性。
(八)細胞分化研究(Cell Differentiation):可在培養箱中對細胞進(jìn)行長(cháng)時(shí)間動(dòng)態(tài)分析。
IncuCyte Zoom的應用總結:
1)監測細胞增殖(Proliferation):通過(guò)實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)成像,對細胞增殖進(jìn)行非侵入性的、定量的分析;
2)細胞培養質(zhì)控(Cell Culture QC)/細胞培養優(yōu)化(Cell Culture Optimization):通過(guò)實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)成像,可生成基于細胞飽和度的動(dòng)態(tài)生長(cháng)曲線(xiàn);
3)監測細胞毒性(Cytotoxicity):將染料和細胞混合然后讀數,操作者可離開(kāi),是基于染料的實(shí)驗;
4)監測細胞凋亡(Apoptosis):將凋亡試劑和細胞混合然后讀數,操作者可離開(kāi),是基于染料的實(shí)驗;
5)監測細胞遷移(Cell Migration)/細胞侵襲(Cell Invasion):配套高度一致性的96孔傷口劃痕工具,實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)監測傷口的愈合過(guò)程,可得到細胞運動(dòng)的定量指標;
6)監測血管新生(Angiogenesis):使用通過(guò)驗證的血管新生試劑盒,具有動(dòng)態(tài)分析血管新生的定量指標;
7)監測報告基因(Reporter Gene):細胞無(wú)需裂解,可獲得實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)數據;
8)細胞分化研究(Cell Differentiation):在培養箱中對細胞進(jìn)行長(cháng)時(shí)間動(dòng)態(tài)分析等。
總結:
以上一些關(guān)鍵的重要的應用介紹,展示了IncuCyte Zoom 系統在定量的、非入侵性的、實(shí)時(shí)細胞分析上的作用。非標記、非損傷性的成像技術(shù)以及數據分析可以讓用戶(hù)獲得高質(zhì)量的圖像、錄像和數據。與其他利用電子阻抗監測細胞不同,IncuCyte可以記錄細胞形態(tài),得到圖像和動(dòng)態(tài)的錄像。另外,Essen還開(kāi)發(fā)出更多的活細胞實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)觀(guān)察試劑盒(live cell kinetic assays and reagents),與Zoom配套使用,進(jìn)行實(shí)驗開(kāi)發(fā)(assay development)、技術(shù)評估(technology assessment)、外包服務(wù)(fee-for-service outsourcing)和藥物開(kāi)發(fā)合作(drug discovery partnerships)。